Ligasi veloce 400 U/UL del DNA T4 della costruzione della biblioteca di NGS per uso di ricerca SOLTANTO

Ligasi veloce del DNA T4 (400 U/ΜL)

La ligasi veloce del DNA T4 è un singolo prodotto degli enzimi che può essere usato per collegare le sequenze di DNA e l'adattatore nel corso della costruzione della biblioteca di NGS. Il prodotto è stato verificato da alta capacità di lavorazione che ordina ed ha qualità eccellente. Questo enzima ha un'abilità di legatura altamente efficiente, che è molto adatta a legatura dei frammenti acidi nucleici complessi, quale l'adattatore di Ω della piattaforma di MGI. È raccomandato per selezionare il modulo di legatura del DNA di Ultima di Hieff NGSTM (Cat#12604) di cui la componente del centro è ligasi veloce del DNA T4 per i clienti che non hanno bisogno dell'adeguamento del sistema.

Informazioni di prodotto

Descrizione di prodotto circa la ligasi veloce del DNA T4

La ligasi veloce del DNA T4 è un singolo prodotto degli enzimi che può essere usato per collegare le sequenze di DNA e l'adattatore nel corso della costruzione della biblioteca di NGS. Il prodotto è stato verificato da alta capacità di lavorazione che ordina ed ha qualità eccellente. Questo enzima ha un'abilità di legatura altamente efficiente, che è molto adatta a legatura dei frammenti acidi nucleici complessi, quale l'adattatore di Ω della piattaforma di MGI. È raccomandato per selezionare Hieff NGSIl TMModulo di legatura del DNA di Ultima (Cat#12604) di cui la componente del centro è ligasi veloce del DNA T4 per i clienti che non hanno bisogno dell'adeguamento del sistema.

Componenti del prodotto della ligasi veloce del DNA T4

Istruzioni

1. I corredi di costruzione correnti della biblioteca del DNA della corrente principale non sono purificati generalmente dopo la riparazione di conclusione ed il trattamento della Un-parte incastrata di un mattone in aggetto e direttamente realizzano la legatura dell'adattatore. Riferisca prego alla seguente preparazione per il sistema di reazione. Il vortice completamente, fila brevemente ed incubare per il min 15 a 20°C.

[Nota]: il PIOLO 6000 di *50% non è fornito nel corredo, voi deve prepararlo da solo.

** Riferisca alla seguente tavola per la quantità di adattatore.

Il *** la quantità di ligasi veloce del DNA T4 usata può essere μL aggiunto 1-5 come avuto bisogno di.

2. La qualità e la concentrazione di adattatori utilizzati direttamente colpiscono l'efficienza di legatura ed il rendimento delle biblioteche. Troppo uso dell'adattatore può produrre più dimeri dell'adattatore, mentre l'uso più basso può colpire l'efficienza di legatura ed il rendimento delle biblioteche. Il seguente piano presenta la quantità raccomandata di adattatore utilizzata nelle situazioni introdotte differenti del DNA facendo uso di questo corredo.

[Nota]: Introdotto DNA talpa (pmol) ≈ introduce DNA)/[(di NG 0,66 lunghezze di media del DNA introdotte × (punto di ebollizione)].

Esempio di calcolo di legatura dell'adattatore: Quanto adattatore dovrebbe aggiungersi quando il DNA dell'input è 100 NG e la lunghezza è punto di ebollizione 300?

Punto 1: Calcoli il numero delle moli del DNA dell'input. Formula: Introdotto DNA talpa (pmol) ≈ introduce DNA)/[(di NG 0,66 lunghezze di media del DNA introdotte × (punto di ebollizione)]; ÷ introdotto =100 (0.66×300) della talpa del DNA (pmol) = 0,5 pmol;

Punto 2: Secondo la tavola di cui sopra, calcoli il numero delle talpe dell'adattatore aggiunte.; Quando il DNA introdotto è 100ng, il rapporto molare degli adattatori: il DNA dell'input è 100:1 ed il numero delle talpe del pmol degli adattatori added=100×0.5 pmol=50;

Punto 3: Calcoli il volume dell'aggiunta dell'adattatore. Concentrazione nell'adattatore = 15 μmol/L (se utilizzate l'adattatore dell'altra società, dovete determinare la sua concentrazione secondo le sue istruzioni); Il volume di adattatore aggiunto = talpe dell'adattatore ha aggiunto (la concentrazione nel ÷ di pmol 50) dell'adattatore (15 μmol/L) = 3,34 μL (nota: 15 μmol/L = un μL di 15 pmol/);

Riassumendo, il volume a cui l'adattatore può aggiungersi è μL 3,4. (Nota: Il volume massimo dell'aggiunta dell'adattatore non supera il μL 5).

Trasporto e stoccaggio

Il prodotto è spedito con i pack e può essere immagazzinato a -20°C per due anni.

Definizione dell'unità

In un sistema di reazione di legatura di 20 μL, quando il μg 6 di λDNA-posterioreⅢ è reagito a 16℃ per 30 minuti, la quantità di enzima richiesta per dare la legatura più di di 50% delle sequenze di DNA è stata definita come un'unità (u).

Avvertenze

1. La ligasi del DNA T4 è sensibile a denaturazione fisica. Nel mescolarsi, inverta delicatamente il tubo e scuota bene. Non scuota vigoroso;

2. Gli enzimi dovrebbero essere immagazzinati in un contenitore di ghiaccio o su un bagno di ghiaccio una volta usati e dovrebbero essere immagazzinati a -20°C subito dopo di uso;

3. Questo prodotto è per uso della ricerca SOLTANTO!

4. Per la vostri sicurezza e salubrità, indossi prego i cappotti del laboratorio ed i guanti eliminabili per l'operazione.

Se avete bisogno di più informazioni su questa ligasi veloce del DNA T4 (400 U/ΜL), contatti prego con noi, grazie